Razumijevanje savjeta s niskim vezanjem pipeta

1. Koji su savjeti s pipetama s niskim vezama?

Savjeti za pipetu s niskim vezama su laboratorijski potrošni materijal dizajniran za pipete (pipete) koji sadrže posebne površinske tretmane i/ili su izrađeni od određenih materijala. Njihov je temeljni cilj dizajna značajno smanjiti adsorpciju i zadržavanje uzorka na unutarnjem zidu vrha .

• Osnovni problem: Stiardni vrhovi polipropilena imaju površine s svojstvenom hidrofobnom i nabojem, što može dovesti do nespecifične adsorpcije određenih komponenti uzorka, posebno biomolekula (poput proteina, nukleinskih kiselina) i viskoznih otopina.
• Otopina: Niski vrhovi vezanja mijenjaju površinska svojstva unutarnjeg zida fizičkim ili kemijskim metodama, što ga čini hidrofilnijim i inertnim, smanjujući na taj način sile interakcije između molekula i zida vrha.

2. Kako rade (tehnologije površinskog liječenja)

Nizak učinak vezanja prvenstveno se postiže sljedećim tehnologijama:

• Posebni polimerni aditivi: Uključujući specifične polimerne aditive (npr. Hidrofilne modifikatore) u osnovni materijal od polipropilena tijekom proizvodnje, dajući vrhovno tijelo svojstvena svojstva niskog vezanja. Ovo je trenutna glavna i najstabilnija metoda.
• Površinski premazi:
  • Hidrofilni premazi: Primjena hidrofilnog premaza (npr. Određenih polimernih premaza) na unutarnji zid kako bi se povećala površinska vlažnost, smanjila zadržavanje tekućine i adsorpcija proteina.
  • Inert premazi: Primjena visoko inertnih premaza (npr. Određenih silanskih derivata) kako bi se smanjila površinska aktivna mjesta i minimizirala kemijsku adsorpciju.
• Posebni površinski tretmani: Promjena mikrostrukture i kemijskih svojstava površine polipropilena fizičkim metodama (npr. Pročišćenjem plazmom) ili kemijskim jetkanjem za povećanje hidrofilnosti.
• Ultra-visoka čistoća polipropilen: Korištenje polipropilenske sirovine s izuzetno niskim sadržajem nečistoće za smanjenje potencijalnih adsorpcijskih mjesta uzrokovanih nečistoćom.

3. Ključne prednosti i značajke

• Minimizira gubitak uzorka: Ovo je temeljna prednost. Značajno smanjuje adsorpciju i zadržavanje dragocjenih, nisko koncentracija ili sitnih uzoraka (npr. Proteini, DNA, RNA, enzimi, antitijela, stanične suspenzije, viskozni reagensi) na zidu vrha, osiguravajući pipting točnost i oporavak .
• Poboljšava eksperimentalnu preciznost i obnovljivost: Smanjena adsorpcija znači dosljedniju količinu izdavanja, snižavanje eksperimentalnih pogrešaka uzrokovanih prenošenjem uzorka i poboljšanjem rezultata pouzdanost and obnovljivost .
• Smanjuje rizik unakrsne kontaminacije: Potpuniji tekući protjerivanje i manje ostataka uzorka smanjuju rizik od unakrsne kontaminacije kada sekvencijalno pipkuju različite uzorke.
• Idealno za osjetljive primjene: Minimizira utjecaj na aktivnost uzorka, što ih čini posebno prikladnim za eksperimente osjetljivih na adsorpciju u molekularnoj biologiji, staničnoj biologiji, proteomici, dijagnostici itd.
• Poboljšava vlažnost: Obično pokazuju bolju hidrofilnost, omogućujući tekućini da se glatko teče unutar vrha, smanjujući pridržavanje meniskusa i stvaranje mjehurića, što dovodi do glatkog rada pipeta.

4. Ključne aplikacije (koji ih eksperimenti posebno trebaju?)

Savjeti s niskim vezama visoko se preporučuju, gotovo bitno, za sljedeće primjene:

• Molekularna biologija:
  • Visoka propusna PCR, qPCR, DDPCR: smanjuje gubitak DNA/predloška, ​​osiguravajući učinkovitost pojačanja i točnost kvantifikacije.
  • Pročišćavanje nukleinske kiseline i priprema knjižnice: sprječava gubitak dragocjenih fragmenata DNA/RNA tijekom pročišćavanja.
  • Priprema uzoraka NGS -a: Precizno piptiranje minutnih knjižnica je kritično.
• Istraživanje proteina:
  • Testovi koncentracije proteina (BCA, Bradford, itd.): Sprječava adsorpciju proteina što dovodi do podcjenjivanja koncentracije.
  • Testovi aktivnosti enzima/kinetika: osigurava točnu količinu enzima i izbjegava gubitak aktivnosti.
  • Priprema uzorka Western blot -a: Precizno piptiranje proteina u puferima koji sadrže SDS ili reducirajuća sredstva.
  • Pročišćavanje proteina (npr. Prikupljanje frakcije afiniteta kromatografije): Izbjegava gubitak ciljanog proteina.
• Stanična kultura i srodni eksperimenti:
  • Passing/Platanje dragocjenih staničnih linija ili primarnih stanica: smanjuje gubitak stanične adhezije unutar vrha.
  • Ispitivanja vitalnosti stanica: Točno piptiranje staničnih suspenzija i reagensa.
  • Transfekcija: Precizno pipetiranje DNA, RNA, kompleksa reagensa za transfekciju.
• Dijagnostika i klinička ispitivanja: ELISA, kemiluminescentni imunološki test, POCT: osigurava precizne količine uzorka i reagensa, poboljšavajući osjetljivost i točnost otkrivanja.
• Viskozna ili pjenasta rješenja: Glicerol, DMSO, otopine površinski aktivnih tvari, određeni puferi: smanjuje zadržavanje i prenošenje, poboljšavajući točnost pipeta.
• Svaki eksperiment koji uključuje dragocjene, minute uzorke ili zahtijeva visoku preciznost i obnovljivost.

5. Kako odabrati desni niski vrh pipete?

• Kompatibilnost: Primarni zahtjev je da oni mora Budite savršeno kompatibilni sa svojim brandom i modelom Pipete. Uvijek provjerite popise kompatibilnosti ili se obratite vodiču proizvođača prije kupnje.
• Potvrde i kvaliteta:
  • Certificirana RNase/DNase/bez pirogena: Presudno za eksperimente molekularne biologije i stanične kulture. Osigurati pouzdanu certifikaciju.
  • Certificirani PCR inhibitor bez inhibitora: Vrlo važno za PCR/qPCR aplikacije.
  • Kvaliteta proizvodnje: Visokokvalitetna proizvodnja osigurava precizne dimenzije, dosljedan oblik, odsutnost provala i nedostatak kontaminacije čestica (ocjena čistoće). Odaberite ugledne marke.
• Niska razina performansi vezivanja: Izvedba može varirati između marki i serija. Obratite pažnju na podatke o performansama koje pružaju proizvođači (npr. Izvješća o ispitivanju ostataka proteina). Za izuzetno zahtjevne aplikacije (npr., Jednoćelijske sekvenciranje, detekcija proteina ultra niskog broja) mogu biti potrebni vrhunski vrhovi niskog vezanja.
• Pakiranje i sterilnost:
  • Format pakiranja: Raketirani (složeni ili rasuti), vreće, filtrirano (neobavezno). Odaberite pakiranje koje odgovara vašem tijeku rada i potreba za automatizacijom.
  • Filtrirani savjeti: Ako je potrebno sprječavanje kontaminacije aerosola osovine pipete, odaberite niske vrhove vezanja s filtrima (vrhovi filtra s niskim vezama). Sam filter također bi trebao biti nisko vezanje.
  • Prethodno steriliziran: Većina eksperimenata zahtijeva unaprijed sterilizirane savjete (obično gama ozračene). Provjerite metodu sterilizacije i razinu osiguranja sterilnosti (SAL). Nesterilni savjeti prikladni su za neke nekritične primjene ili ako laboratorij izvodi vlastitu sterilizaciju.
• Isplativost: Niski savjeti za vezanje općenito su skuplji od standardnih savjeta. Procijenite isplativost tijekom ispunjavanja zahtjeva za izvedbu. Nemojte kompromitirati kritične eksperimente pomoću standardnih savjeta za uštedu troškova, jer netočni podaci ili gubitak uzorka mogu dovesti do većeg otpada.

6. Napomene o upotrebi

• Pravilan prilog: Provjerite je li savjet sigurno i čvrsto pričvršćen na pipetu bez praznina kako bi se spriječilo curenje zraka i netočne količine.
• Prethodno vlaženje: Za viskozne ili hlapljive tekućine, prije vlaženja (aspiracije i dodjele tekućine nekoliko puta prije stvarnog prijenosa) ponekad može dodatno poboljšati točnost (čak i s niskim vrhovima vezanja). Slijedite pipete smjernice za rad.
• Izbjegavajte dodirivanje završetka vrha: Održavajte sterilnost i spriječite onečišćenje.
• Skladištenje: Čuvajte na hladnom, suhom mjestu daleko od izravne sunčeve svjetlosti i prašine. Obratite pažnju na datum isteka na pakiranju.