Kakav je utjecaj odabira veličine pora filtriranih vrhova za pipete na eksperimentalne uzorke?

Filtrirani vrhovi pipeta igraju ključnu ulogu u mnogim eksperimentalnim poljima kao što su moderna biologija, kemija i medicina. Odabir njegove veličine pora izravno je vezan uz kvalitetu eksperimentalnih uzoraka, točnost eksperimentalnih rezultata i ponovljivost eksperimenata.
Prije svega, veličina pora će utjecati na učinak filtriranja nečistoća u uzorku. Ako je veličina pora prevelika, neke sićušne čestice nečistoće, kao što su ostaci stanica, čestice prašine ili neotopljene tvari, mogu ući u uzorak tijekom procesa pipetiranja. Ove nečistoće mogu ometati eksperimentalnu reakciju. Na primjer, u eksperimentima sa staničnom kulturom, nečistoće se mogu zalijepiti za površinu stanice, utjecati na normalan rast i metabolizam stanica i uzrokovati odstupanja u eksperimentalnim podacima. Naprotiv, ako je veličina pora premala, iako može učinkovitije presresti nečistoće, može adsorbirati ciljane komponente u uzorku, posebno neke makromolekule, kao što su proteini, nukleinske kiseline itd. To će dovesti do smanjenja koncentraciju uzorka i također učiniti eksperimentalne rezultate netočnima.
Za različite vrste eksperimentalnih uzoraka, odgovarajuća veličina pora je također različita. Kada se radi o suspenzijama stanica, obično je potrebno odabrati veličinu pora koja može učinkovito filtrirati stanične ostatke bez nanošenja oštećenja stanicama. Općenito govoreći, češće se koristi veličina pora od 0,2 - 0,45 mikrona. Ovaj raspon veličine pora može blokirati većinu nečistoća kao što su stanični ostaci i bakterije, osiguravajući čistoću i aktivnost stanica tijekom pipetiranja. Prilikom provođenja eksperimenata ekstrakcije nukleinske kiseline, kako bi se izbjeglo lomljenje genomske DNA i osigurao integritet RNA, odabir veličine pora filtra trebao bi biti pažljiviji. Obično se odabire veličina pora od oko 0,2 mikrona, koja ne samo da može ukloniti moguće nečistoće, već i minimizirati silu smicanja na molekule nukleinske kiseline.
Osim toga, veličina pora filtra također će utjecati na točnost i glatkoću pipetiranja. Premala veličina pora može povećati otpor tekućine kada prolazi kroz njih, što rezultira sporijom brzinom pipetiranja, pa čak i ostacima tekućine. To ne samo da će smanjiti učinkovitost eksperimenta, već može utjecati i na rezultate eksperimenta zbog netočnog pipetiranja volumena. Odgovarajuća veličina pora filtra može osigurati da tekućina glatko prolazi kroz vrh pipete tijekom procesa pipetiranja, poboljšavajući točnost i ponovljivost pipetiranja.